病菌 PCR 分型诊断方法 第2部分：产气荚膜梭菌 PCR 分型检测方法 |
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| 标准编号：DB21/T 2734.2-2017 |
标准状态：现行 |
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| 标准价格：0.0 元 |
客户评分：  |
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本标准规定了产气荚膜梭菌A、B、C、D、E 五型PCR检测方法的技术要求。
本标准适用于产气荚膜梭菌病的诊断、监测及流行病学调查，适用于动物粪便、肠内容物及纯培养物中产气荚膜梭菌α-毒素、β-毒素、ε-毒素和ι-毒素基因的PCR检测。
本标准中的试验操作应在生物安全Ⅱ级（BSL-2）以上的实验室进行。 |
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| 英文名称： |
Method of PCR typing diagnosis for bacterial Part2：Method of PCR typing detection for Clostridium perfringens |
 中标分类： |
农业、林业>>畜牧>>B41动物检疫、兽医与疫病防治 |
| ICS分类： |
医药卫生技术>>11.220兽医学 |
| 发布部门： |
辽宁省质量技术监督局 |
| 发布日期： |
2017-02-23 |
| 实施日期： |
2017-03-23
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| 提出单位： |
辽宁省动物疫病预防控制中心 |
| 归口单位： |
辽宁省畜牧兽医局 |
| 主管部门： |
辽宁省畜牧兽医局 |
| 起草单位： |
辽宁省动物疫病预防控制中心、辽宁省动物医学研究院 |
| 起草人： |
赵凤菊、顾贵波、关淼、杨本勇、于长泳、李井春、马建山、魏园园、梁乔、张雷、郑付华、王欣、邓文超、王竹 |
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标准《病菌 PCR 分型诊断方法》按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。
标准《病菌 PCR 分型诊断方法》分为两个部分：
——第 1 部分：大肠杆菌 PCR 检测方法；
——第 2 部分：产气荚膜梭菌 PCR 分型检测方法。
本部分为病菌 PCR 分型诊断方法的第 2 部分。
本分由辽宁省动物疫病预防控制中心提出。
本标准由辽宁省畜牧兽医局归口。
本标准起草单位：辽宁省动物疫病预防控制中心、辽宁省动物医学研究院。
本标准主要起草人：赵凤菊、顾贵波、关淼、杨本勇、于长泳、李井春、马建山、魏园园、梁乔、张雷、郑付华、王欣、邓文超、王竹。 |
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前言II
1范围1
2规范性引用文件1
3缩略语1
4原理1
5仪器和器材1
6试剂和引物1
61试剂2
62引物2
7操作步骤2
71样品的采集、前处理、存放与运输2
711采样注意事项2
712采样工具2
713肠内容物的采集与前处理2
714粪便的采集与前处理3
715产气荚膜梭菌纯培养物3
716存放与运送3
72PCR检测3
721DNA提取3
722PCR3
7222电泳PCR反应条件4
7223电泳4
8试验成立的条件4
9结果判定4
附录A（规范性附录）试剂配制5
A1电泳缓冲液（50倍）5
A1105mol/L乙二铵四乙酸二钠（EDTA）溶液（Ph80）5
A12TAE(三羟甲基氨基甲烷一乙酸)电泳缓冲液(50倍)5
A21%琼脂糖凝胶5 |
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下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
中华人民共和国农业部公告第302号 兽医实验室生物安全技术管理规范
GB/T 4789.13 食品卫生微生物学检验 产气荚膜梭菌检验
SN 0177 出口食品中产气荚膜梭状芽孢杆菌检验方法
GB 16548-2006 病害动物和病害动物产品生物安全处理规程
GB 19489 实验室 生物安全通用要求
SN/T2025-2007 动物检疫实验室生物安全操作规范
SN/T 2709-2010 国境口岸产气荚膜梭菌毒素检测方法 |
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